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发表日期:2023-03-30 03:15| 来源 :本站原创 | 点击数:838次
本文摘要:三、倒平板操作:1、将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。2、在火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉塞。四、平板划线操作:
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两步移植法移植两个胚胎成双胞胎的概率还是比较低的,只有在女性子宫环境好,并且胚胎鲜胚质量好的情况下,才会成功。如果移植一个胚胎,患者的身体情况不好,会导致移植成功率不高,移植两个胚胎是为了保证至少有一个胚胎存活,所以移植两个胚胎成双胞胎的情况是不多的,并且妊娠双胎的风险也比较高。

试管婴儿移植胚胎成双胞胎的案例还是有的,只是妊娠双胎的风险很高,妊娠期间也会有很多并发症,如果胎儿情况不好或者是孕妇身体不理想,医生也会建议减胎,下面可以了解一下移植两个胚胎成双胞胎的概率:

1.一般情况下,生殖中心会做单胚胎移植,只移植一个胚胎,则发生双胞胎的几率就较低;

2.如果如果移殖2-3个胚胎,发生双胞胎甚至三胞胎的几率较高,部分双胞胎的几率只有3%-8%,有的会到30%-40%;

3.两步移植法移植两个胚胎会比单胎的几率高,但移植两个胚胎到女性体内,发生多胎妊娠的发生几率要明显高于自然妊娠,根据数据显示试管婴儿双胎妊娠的几率大概30%左右。

从发育程度来说,桑椹胚比3天卵裂胚好一些,哪个质量好还是要看胚胎的实际情况,需要结合胚胎碎片、细胞数、卵裂球的均一度这些来综合评判。其实桑葚胚也属于卵裂期胚胎,只不过相比三天卵裂胚发育更快一些,细胞数更多一些。在实际中胚胎发育快慢不一,3天卵裂胚正常的细胞数是8个,但也有发育到12个左右的,而达到16个细胞就为成为桑葚胚。

如果是单从3天的卵裂胚和4天的桑葚胚来说的话,桑椹胚和囊胚的区别在于细胞数和发育时间以及移植成功率等,但质量就不好说了,卵裂胚桑椹胚质量区别就要看胚胎碎片率了。这里就为大家说明一下桑椹胚和卵裂胚的区别:

1.发育时间:因为卵裂期胚胎包含桑葚胚,而在体外受精后的第一天形成的胚胎叫受精卵,第四天的叫桑葚胚,所以第二天到第四天的都是“卵裂期胚胎“;

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2.细胞数:正常来说,第2天卵裂胚细胞数是4个,第3天是8个,第4天的桑葚胚是16个;

3.质量:就要看细胞碎片率了,通常碎片率在20%以内的都是优质胚胎,21%-50%的算中等,以上的是比较差了;

4.移植成功率:如果是质量相同的桑椹胚和卵裂胚,那么桑椹胚移植成功率就要高一些,但质量不同的话,就都有可能了。



一、无菌准备:

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1、提前1个小时打开无菌室紫外灯消毒灭菌
1、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒;
2、将用于微生物培养的器皿、接种的用具和培养基等进行灭菌;
3、所有无菌操作都需在酒精灯旁操作。

二、培养基配置:

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1、LB肉汤:肉汤粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸馏水; .


2、营养琼脂培养基:琼脂培养基粉300g、5g葡萄糖、1000ml蒸馏水。

三、倒平板操作:

1、将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰;
2、用左手将培养皿打开-条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥

形瓶中的培养基(约10~20ml)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,轻轻摇匀。

3、等待平板冷却凝固(大约需5~10min) 后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。

四、平板划线操作:

1、将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红;


2、在火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉塞;


3、将试管口通过火焰;将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取一环菌液;将试管口通过火焰,并塞上棉塞;


4、左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。注意不要划破培养基。


5、灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始 往第二区域内划线。重复以上操作,在三区域内划线。注意不要将最后一区域的划线与第一区相连。

6、将平板倒置,放入培养箱中培养。

五、稀释操作:

1、将分别盛有9ml水的6支试管灭菌,并按10~10的6次方(打不出六次方来)的顺序编号。
2、用移液管吸取1ml培养的菌液,注入10倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸三次,使菌液与水充分混匀。

3、从

10

倍稀释的试管中吸取1ml稀释液,注入

10

2

倍稀释的试管中,重复第2步的混匀操作。

依次类

推,直达完成最后一支试管的稀释。注:移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应在离火焰的1~2cm处。

五、涂布平板操作:

1、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中;
2、取少量菌液(不超过0.1ml),滴加到培养基表面;
3、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s;
4、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。

注意事项:


1、将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中。取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。
2、操作中一定要注意防火!不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。

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